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香菇液体菌种的生产

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导语:液体菌种是采用液体培养基,通过液体振荡培养或液体深层培养获得的菌丝球、菌丝片段和培养基的复合物。

一:液体菌种用于香菇栽培,具有以下优越性:

1.工艺流程快,生产周期短

培养1瓶(袋)固体菌种(木屑种),需要40~50天,而制备液体菌种只需要5~7天,用液体菌种作原种或栽培种,可缩短生产周期一个月以上。

2.菌龄一致

固体菌种瓶(袋)上下部的菌丝菌龄差异很大,一般可达20多天;而液体菌种菌丝球和菌丝片段可以多点同步增殖,菌龄比较一致,菌丝活力旺盛,萌发和发菌时间短。

3.操作简便

液体菌种接种可通过注射等方式,速度快,操作简单。

4.生产条件比较稳定,有利于机械化、自动化生产,提高了生产效率

液体菌种也存在一定的缺陷:一是菌种不耐贮藏,一般必须尽快使用完毕,不然菌丝会老化、自溶。二是生产工艺比较复杂,需要配套设备,技术要求过硬,不然容易污染杂菌。三是液体菌种容易退化,必须经常更新菌种。不管如何,液体菌种符合当前香菇发展的趋势,必将得到更广泛的应用。

二:香菇常用的液体菌种培养基有:

1.土豆克(去皮,取汁),蔗糖20克,水毫升。

2.土豆克(去皮,取汁),蔗糖20克,磷酸二氢钾5克,硫酸镁5克,水毫升。

3.葡萄糖30克,豆饼粉20克(取汁),玉米粉10克(取汁),酵母粉5克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁1.5克,碳酸钙2克,水毫升。

4.可溶性淀粉40克,蔗糖10克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁1.5克,酵母粉1克,水毫升。

5.蛋白胨5克,葡萄糖20克,磷酸二氢钾0.5克,硫酸镁0.5克,水毫升。

6.蔗糖40克,玉米粉20克(取汁),硝酸铵2克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁0.5克,维生素B10.01克,水毫升,pH值6.0。

三:恒温振荡培养

根据使用的恒温振荡培养器需要,采用毫升、毫升或毫升三角瓶,配制液体培养基。培养基分装量占三角瓶容积的1/5~1/4,并装人玻璃珠10~15粒。采用6-8层纱布或两层纱布中间夹一些棉花(称为透气塞)封口,外部再用牛皮纸包一层。℃灭菌30分钟,冷却到30℃左右,接入活化的斜面菌种,每瓶接人黄豆大小的菌种块5~6块(带少量的培养基),使菌丝面朝上,漂浮在液体表面。

先25℃左右静置培养48小时。当菌丝延伸到培养液中时,置往复式或旋转式恒温振荡培养器,振荡频率转/分,振幅(冲程)8~12厘米,25℃左右振荡培养5~8天,获得大量菌丝球或菌丝片段,直接用于制作栽培种或作二级种子供发酵罐接种使用。作栽培使用的,每一栽培袋(瓶)接入液体菌种10毫升左右,如果培养过程中培养基出现混浊,说明可能有细菌污染,应立即终止培养。

四:液体深层发酵

液体深层发酵采用成套发酵设备进行,工艺复杂,对无菌操作要求严格,目前只适用于大型香菇栽培场。

采用通气搅拌式发酵罐,香菇液体深层发酵的工艺流程为:

斜面菌种→25℃摇瓶培养5~8天→摇瓶菌种(一级种子)→二级种子罐(~升)25℃通气培养5天→二级种子→发酵罐25℃通气搅拌培养5~7天→液体菌种。

香菇液体深层培养过程是一个动态过程。随着香菇菌丝的生长、代谢活动的增强,罐内的温度、溶氧量、pH值、底物的消耗、产物的生长等无时无刻不在发生变化。随着日益发展的传感器技术及计算机技术在发酵工业上的应用,使得很多参数例如pH值的连续测定、溶氧量的连续测定,排气中含氧量及二氧化碳的测定等都可以通过相应的传感器如电化学传感、磁导、热导、电导感应器等来跟踪。

发酵过程中的物理参数如温度(培养液温度、冷却水进出口温度、空气进出口温度)、压强(空气进出口压强)、空气流量、液体流量(包括补料、排料流量、冷却水流量等)、搅拌转速及功率、培养液重量、黏度、液面泡沫消涨程度等,化学及物化参数如培养液的pH值、溶解氧及二氧化碳浓度等,生化参数如培养液中菌丝浓度、菌体中或培养液中DNA、三磷酸腺苷(ATP)等的含量等参数输人计算机,经计算机以特定的数学模型进行综合处理,给出待控制的参数,再通过自动控制系统来完成,就会使整个发酵过程处于自动监控状态。

总结:种子罐和发酵罐的接种量均为10%左右。也可采用气升式发酵罐培养香菇液体菌种。用于液体菌种的深层培养,获得的菌丝球不宜过大,因此要优化发酵条件,获得最佳的发酵工艺,以生产符合需要的液体菌种。

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